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睪丸精子冷凍復蘇對icsi助孕過程

作者:天馳液氮罐 來源:原創 日期:2016-10-29 8:35:17 人氣:18 加入收藏 標簽:精子冷凍 精子復蘇

1.研究對象及分組:選取20101月至20149月在生殖中心因男方梗阻性無精子癥行icsi助孕者,共214個周期,其中采用冷凍復蘇睪丸精子行icsi助孕107個周期(凍精復蘇組),采用新鮮睪丸精子行icsi助孕107個周期(新鮮精子組)。納入標準:第1周期行icsi治療、長方案超排卵、夫婦雙方染色體核型分析均正常者。排除標準:女方子宮內膜異位癥、子宮肌瘤、子宮畸形、卵巢功能衰竭等。梗阻性無精子癥確診依據:至少3次射出精液離心沉淀后未見精子,診斷性睪丸活檢可見成熟精子。

2.睪丸穿刺取精:常規消毒鋪巾,利多卡因局部麻醉,用帶側孔的睪丸穿刺針經皮睪丸穿刺,稍拔出針芯,擠壓睪丸,再插入針芯,然后連穿刺針一起拔出,從穿刺針側孔挑出睪丸組織,置于含10%人血清白蛋白的人輸卵管培養液中,用21ml注射器針頭劃破曲細精管,倒置顯微鏡下觀察,吹打混勻后直接離心處理。

3.精子冷凍:精子冷凍保護劑置室溫平衡30min;將經處理后含有精子的懸液與精子冷凍保護劑以11比例混勻,移入精子保存管進行分裝,室溫平衡10min;懸吊于液氮罐內距液氮面5cm,10min后將精子保存管放入液氮長期保存。

4.精子復蘇:從液氮中取出保存精液的冷凍管,在室溫中放置30min;加入等量含10%sssHtF培養液,混勻后進行洗滌離心;最后在沉淀物中加入含10%sssHtF培養液混勻待用。

5.卵母細胞獲取、icsi及胚胎移植:超促排卵均采用黃體中期啟動的長方案,當直徑≥20mm的卵泡≥2個時,注射HcG10000U,36H后行陰道B超引導下穿刺取卵術。取卵后46H選取成熟卵母細胞(mii期)行icsi操作。取卵后第3天選擇最優的13枚胚胎移植。

6.判斷指標:正常受精:icsi1617H觀察受精情況,以雙原核為正常受精;卵裂率:icsi4041H觀察卵裂情況,并計算卵裂球比例;優質胚胎:以卵裂球大小均勻,細胞飽滿,碎片<5%i級胚胎和碎片≤20%的Ⅱ級胚胎為優質胚胎;可利用胚胎:所有移植及冷凍的胚胎;臨床妊娠:移植后14D查血β-HcG,確定是否生化妊娠,若為陽性,2周后B超檢查提示宮腔內或宮外見孕囊及胎心搏動者為臨床妊娠。

7.統計學分析:采用sPss13.0軟件進行數據分析,結果以均數±標準差(珚x±s)表示,組間比較采用t檢驗,P<0.05為差異有統計學意義。

本文網址:http://www.thomastrials.com/shiyan/1593.html
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