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精子活力測定方法

作者:天馳液氮罐 來源:原創 日期:2017-05-15 8:06:15 人氣:22 加入收藏 標簽:低溫冷凍 精子冷凍

以過濾海水(水溫15℃、pH8.1、鹽度27%)為激活液(下同),精液與激活液混合后在顯微鏡下觀察精子活力(激活率、活動時間和壽命)。激活率為給定視野中被激活精子的數量占全部精子數量的百分比;運動時間是指精子自激活開始至90%的精子原地顫動為止所經歷的時間;精子的壽命指精子從激活開始至90%的精子停止運動的時間。實驗重復3次。
稀釋液種類對精子超低溫冷凍保存效果的影響試驗分別以HBSS、MPRS、Cortland液為稀釋液(如表一),以10%EG為抗凍劑(抗凍劑為終濃度,下同)配制抗凍液;將精液與抗凍液按1︰3比例混勻,4℃平衡30min;將平衡后的精液-抗凍液混合物分裝入0.25mL麥細管中,然后用兩步降溫法(即將盛精麥細管平放在自制簡易降溫裝置的液氮面上7.5cm處,停留10min后投入液氮中)保存。12h后,將麥細管從液氮中快速取出,于40℃水浴中溶化后檢測精子激活率。


稀釋比例對精子超低溫冷凍保存效果的影響試驗以10%EG為抗凍劑、Cortland液為稀釋液配制抗凍液,將精液與抗凍液按1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:7、1:9混勻,按前文方法冷凍保存精子及解凍與激活率檢測。
抗凍劑種類及濃度對精子超低溫冷凍保存效果的影響試驗以5%、10%、15%及20%四個濃度的DMSO、Gly、EG、PG為抗凍劑、Cortland液為稀釋液配制抗凍液,將精液與抗凍液按1︰3混勻,然后冷凍保存精子及解凍與活力檢測。

本文網址:http://www.thomastrials.com/shiyan/1628.html
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